.

0 (hodnocen0 x )

(0.8) Půjčeno:23x 

BK

Vyd. 4., přeprac.

Brno : Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví, 1995

286 s.

ISBN 80-7013-198-5 (brož.)

000056057

I. Optické metody (RNDr. V. Komárek, RNDr. H. Novotná, RNDr. V. Pospíšilová, RNDr. J. Továrek) 11 // 1. Základy optických metod (RNDr. V. Komárek) 11 // 1.1. Vlastnosti elektromagnetického záření 11 // 1.1.1. Charakteristiky elektromagnetického záření 12 // 1.1.2. Interakce záření s hmotným prostředím 13 // 1.2. Absorpce záření a jeho zákony 15 // 1.2.1. Základní pojmy a zákonitosti absorpční molekulové spektrolotomelric 15 // 1.2.2. Chyby spojené s měřením absorbance 19 // 1.2.3. Zákon Lambertův-Beerův-Bouguerův 20 // 2. Aplikace speklrofotometrie v UV-VIS oblasti spektra na kvantitativní biochemickou // analytiku (principy kalibrace) - RNDr. V. Komárek 27 // 2.1. Výpočet koncentrace látky z molárního absorpčního koeficientu 27 // 2.2. Metoda kalibrační křivky 27 // 2.2.1. Konstrukce kalibrační křivky 28 // 2.3. Metoda jednoho standardu 30 // 2.4. Stanovení za rovnovážných podmínek 33 // 2.4.1. Stanovení substrátů metodou “end point” 33 // 2.4.2. Stanovení katalytické koncentrace enzymu metodou konstantního času 34 // 2.5. Kinetické metody 35 // 2.5.1. Stanovení katalytické koncentrace enzymu kinetickým postupem 35 // 2.5.2. Výpočet katalytické aktivity enzymu (katalytické koncentrace) 38 // 2.6. Přístrojové vybavení pro měření absorbance u fotometrie a spektrometrie 41 // 2.6.1. Princip jednopaprskového spektrofotometru UV-VIS 42 // 2.6.2. Princip dvoupaprskového spektrofotometru 43 // 2.6.3. Nová generace spektrofotometrů UV-VIS 43 // 2.7. Základní prvky optických přístrojů 45 // 2.7.1. Zdroje záření 45 // 2.7.2. Prvky sloužící к získání monochromatického záření (disperzní systémy) 47 // 2.7.3. Absorpční prostředí fotometru 50 // 2.7.4. Detekce záření 51 // 3. Atomová absorpční spektrofotomelrie AAS (RNDr. V. Komárek) 54 //

3.1. Princip atomové absorpční spektrofotometrie 54 // 3.1.1. Absorpce záření volnými atomy 55 // 3.2. Přístrojové vybavení 55 // 3.3. Charakteristika základních částí atomového absorpčního spektrofotometru 57 // 3.3.1. Zdroje záření 57 // 3.3.2. Absorpční prostředí 57 // 3.3.3. Monochromátor a detektor 59 // 33.4. Metodika AAS 59 // 4. Fluorescence molekul (RNDr. V. Komárek) 60 // 4.1. Princip vzniku fluorescenčních spekter 61 // 4.2. Fotoluminiscenční spektra 62 // 4.2.1. Excitační spektrum (aktivační) 62 // 4.2.2. Emisní spektrum - fluorescenční spektrum 62 // 4.3. Kvantový výtěžek iluorescence 63 // 4.4. Závislost intenzity fluorescence na koncentraci fluoreskující látky 63 // 4.5. Přístrojové vybavení 65 // 4.6. Fluorescenční polarizace 67 // 5. Infračervená spektroskopie (RNDr. V. Komárek) 68 // 6. Plamenová emisní spektrofotometrie (RNDr. V. Komárek) 68 // 6.1. Princip plamenové fotometrie 69 // 6.2. Přístrojové vybavení pro plamenovou fotometrii 70 // 6.2.1. Zdroj emisního záření 71 // 6.2.2. Transport vzorku do plamene 72 // 6.2.3. Izolace spektrálních čar 72 // 6.2.4. Detektory záření, indikační obvod, pomocná optika 73 // 6.3. Měření intenzity spektrálních čar-stanovení koncentrace 73 // 6.4. Interference, rušivé vlivy při plamenové fotometrii a jejich eliminace 74 // 6.5. Příklady využití plamenové fotometrie 75 // 7. Rozptyl záření (RNDr. V. Komárek) 76 // 7.1. Turbidimetrie a nefelometrie 76 // 7.2. Reflexní fotometrie 77 // 8. Dcnzitometrie (RNDr. V. Komárek) 77 // 9. Refraktometrie (RNDr. V. Pospíšilová) 78 // 9.1. Refraktometrické veličiny 78 // 9.2. Měření indexu lomu 80 // 9.3. Refraktometry 81 // 10. Polarimetrie (RNDr. J. Továrek) 83 // 11. Hmotnostní spektrometrie (RNDr. H. Novotná) 86 // 11.1. Měřící technika 87 //

12. Nukleární magnetická rezonanční spektroskopie (NMR) 87 // II. Chromatografické metody (Ing. V. Doležalová) 89 // 1. Rozdělovači chromatograťie na papíře 92 // 1.1. Pracovní postup při papírové chromatografii 92 // 1.2. Chromatografie na papíře za použití jednofázových směsí 100 // 2. Sloupcová chromatografie 101 // 2.1. Kapalinová chromatografie 101 // 2.1.1. Pracovní postup kapalinové chromatografie 103 // 2.1.2. Adsorpční kapalinová chromatografie 107 // 42.1.3. Kapalinová chromatografie na měničích iontů 107 // 2.1.4. Gelová kapalinová chromatografie 109 // 2.1.5. Kapalinová chromatografie rozdělovači 112 // 2.1.6. Kapalinová chromatografie afinitní 112 // 2.1.7. Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC 115 // 2.2. Plynová chromatografie (GC) 118 // 2.2.1. Adsorpční plynová chromatografie 119 // 2.2.2. Rozdělovači plynová chromatografie 120 // 2.2.3. Kombinace plynové chromatografie s hmotnostní spektrometrií 121 // 3. Chromatografie na tenkých vrstvách (TLC) 122 // 3.1. Pracovní postup tenkovrstevné chromatografie 122 // 3.2. Vysokoúčinná kapalinová chromatografie na tenkých vrstvách 126 // 3.3. Kombinace tenko vrstevné chromatografie s plynovou chromatografií 126 // 3.4. Kombinace afinitní chromatografie a gelové filtrace na tenké vrstvě 126 // 4. Elektrochromatografie 127 // III. Elektrochemické metody (Ing. V. Doležalová, MUDr. T. Pařák) 129 // 1. Coulometrie (Ing. V. Doležalová) 130 // 2. Coulometrie titrace (Ing. V. Doležalová) 131 // 3. Polarografické metody (Ing. V. Doležalová) 133 // 3.1. Klasická polarografie 133 // 3.1.1. Polarografické ampérometrické titrace 137 // 3.2. Derivační polarografie 137 // 3.3. Pulsní polarografie 137 // 3.4. Diferenční pulsní polarografie 138 // 3.5. Diferenční pulsní anodická inverzní voltametrie 139 //

3.6. Polarografie na tuhých elektrodách - voltametrie 140 // 3.6.1. Clarkova kyslíková elektroda 140 // 4. Konduktomeu ie (Ing. V. Doležalová) 142 // 4.1. Konduktometrické titrace 144 // 5. Potenciometrie (MUDr. T. Pařák ) 145 // 5.1. Druhy elektrod 145 // 5.1.1. Referenční (srovnávací) elektrody 145 // 5.1.2. Indikační (měrné) elektrody 146 // 5.2. Měřící přístroje 149 // 5.3. Teorie pH 150 // 5.4. Poznámky к měření pH ä krevních plynů 151 // 5.5. Potenciometrické titrace (Ing. V. Doležalová) 152 // IV. Elektroforetické metody (Ing. V. Doležalová) 155 // 1. Elektroforéza na papíře 156 // 1.1. Kontinuální (plynulá) elektroforéza na papíře 157 // 2. Elektroforéza na acetylcelulózových foliích 158 // 53. Elektroforéza na agarovém a agarózovém gelu 159 // 3.1. Elektroforéza bílkovin v moči na foliích s agarózovým gelem v přítomnosti SDS 163 // 3.2. Elektroforéza bílkovin na agarózovém gelu při vyšším napětí (Johanson) 163 // 4. Elektroforéza na škrobovém gelu 168 // 5. Elektroforéza na polyakrylamidovém gelu (PAAG) 168 // 5.1. Disková elektroforéza na polyakrylamidovém gelu v trubičkách 170 // 5.2. Elektroforéza na tenké vrstvě polyakrylamidového gelu 171 // 5.3. Kapilární elektroforéza na polyakrylamidovém gelu a v kapalném prostředí 172 // 5.3.1. Kapilární elektroforéza na polyakrylamidovém gelu 172 // 5.3.2. Kapilární elektroforéza v kapalném prostředí 173 // 5.4. SDS - elektroforéza na polyakrylamidovém gelu 173 // 5.4.1. Kombinace SDS - elektroforézy s elektroforézou na polyakrylamidovém gelu (dvojrozměrná technika) 174 // 6. Izoelektrická fokusace (IEP) 174 // 6.1. Kombinace izoelektrické fokusace s SDS-elektroforézou na polyakrylamidovém gelu 178 // 6.2. Afinitní elektroforéza 179 // 7. Izotachoforéza 180 //

V. Imunochemické metody (Ing. V. Doležalová) 185 // 1. Reakce antigénu a protilátky (in vitro) 186 // 2. Využití imunochemických metod v klinické biochemii 186 // A. Imunoprecipitační reakce v gelovém prostředí 187 // I. Kvalitativní imunochemické metody 188 // 1. Dvojitá radiální imunodifúze (Ouchterlony) 188 // 2. Imunoelektroforčza - IELFO (Grabar a Williams) 190 // 3. Protisměsná imunoelektroforéza 194 // 4. Imunofixační elektroforéza - imunofixace (IFE) 195 // 5. Imunofluorescenční elektroforéza 197 // 6. Imunoselekce 197 // 7. Imunoblotting (přenos dělených bílkovin z gelového prostředí na nitrocelulózovou membránu a imunochemické detekce sledované bílkoviny) 199 // 11. Kvantitativní imunochemické metody 203 // 1. Jednoduchá radiální imunodifúze dle Manciniové 203 // 2. Elektroimunostanovení dle Laureila 206 // 3. Elektroimunodifúze za použití dvou gelů 208 // 4. Jednoduchá lineární imunodifúze ve zkumavce nebo v kapiláře 208 // 5. Dvojrozměrná imunoelektroforéza podle Clarka a Frcemana 209 // 6. Dvojrozměrná imunoelektroforéza dle Krolla 211 // B. Imunoprecipitační reakce v roztoku 212 // VI. Izotopové a neizotopové imunochemické metody (Ing. V. Doležalová) 215 // A. Izotopové imunochemické metody 220 // I. Radioimunoanalýza - RIA 220 // 6I. I. Klasická RIA // ,221 // 1. I. I. Separační techniky pro oddělení volného značeného antigénu Agnx od značeného // imunokomplexu používané u klasické RIA 222 // 1.2. RIA na pevné fázi 223 // 2. Imunometrická analýza (IRMA) “sendvičová metoda” 227 // 3. Příbuzné radioizotopové metody 227 // 3.1. Radioreceptorová analýza (RRA) 227 // 3.2. Metoda kompetitivní vazby na proteiny (CPBA) 227 // B. Neizotopové imunochemické metody 228 // 1. Enzymoimunoanalýza (EIA) 228 //

I. Kompetitivní enzymoimunoanalýza 229 // a) Homogenní enzymoimunoanalýza (EMIT) 229 // b) Heterogenní enzymoimunoanalýza (ELISA) 230 // 1. Kompetitivní ELISA se značeným antigenem /AgnE) klasická metoda 230 // 2. Kompetitivní ELISA se značeným antigenem - technika pevné fáze 230 // II. Nekompetitivní enzymoimunoanalýza (sendvičová technika ELISA) 231 // 2. Fluoroimunoanalýza (EIA) 237 // I. Kompetitivní EIA 237 // II. Nekompetitivní EIA - sendvičová technika 237 // 2.1. Metoda DELFIA - sendvičová technika 238 // 2.2. Fluorescenční polarizační imunoanalýza (FPIA) 239 // VIL Biospecifické detektory (biospecifické analyzátory) - Ing. V. Doležalová 241 // A. Biosenzory 241 // 1. Enzymové elektrody (enzymové senzory) 241 // 1.1. Stanovení močoviny v séru enzymem ureasou 244 // 1.2. Stanovení glukosy v krvi 244 // 1.3. Přednosti enzymových elektrod 246 // 2. Buněčné elektrody 246 // 3. Tkáňové elektrody 247 // 4. Elektrody afinitní a imunoelektrody 247 // 4.1. Afinitní elektrody 247 // 4.2. Imunoelektrody (imunosenzory) 247 // 5. Biotranzistory 248 // 6. Enzymové termistory 249 // B. Analytické enzymové reaktory 249 // Vili. Osmometrie a onkometrie (MUDr. T. Pařák) 251 // 1. Osmotický tlak 251 // 1.1. Měření osmolality 251 // 1.1.1. Přímé měření osmotického tlaku 251 // 1.1.2. Nepřímé měření osmotického tlaku 252 // 2. Onkotický tlak 253 // 72.1. Měření onkotického tlaku 253 // IX. Ultracentrifugace (RNDr. J. Továrek) 257 // X. Mikrometody a ultramikrometody (Mudr. T. Pařák) 257 // 1. Faktory ovlivňující mikroanalýzu 263 // XI. Suchá činidla v klinické biochemii (Doc. RNDr. P. Stern, CSc.) 263 // 1. Suchá činidla bez nosičů 263 // 2. Suchá činidla na nosičích 263 // 2.1. Vlákna impregnovaná suchými činidly 263 // 2.1.1. Celulózová matrice 263 //

2.1.2. Matrice ze skleněných vláken 264 // 2.1.3. Papírová matrice 264 // 2.2. Použití vícevrstvého filmu 264 // 2.3. Reflexní fotometry 265 // 2.4. Biosenzorová technologie 265 // XII. Odměrná analýza (Ing. V. Doležalová) 267 // 1. Roztoky v odmčrné analýze 267 // 1.1. Příklad výpočtu faktoru odměrného roztoku a jeho přesné koncentrace 268 // 2. Vyjadřování koncentrace roztoků v odmčrné analýze 269 // 3. Technika titrací 270 // 4. Neutralizační (acidobazické) titrace 271 // 4.1. Odmčrné roztoky a základní látky používané v alkalimetrii 273 // 4.1.1. Stanovení faktoru (standardizace) odměrného roztoku hydroxidu 274 // 4.2. Odmčrné roztoky a základní látky používané v acidimetrii 275 // 4.2.1. Stanovení faktoru (standardizace) odměrného roztoku HC1 275 // 5. Srážecí titrace 276 // 5.1. Argentometrie přímá (Mohrova metoda) 277 // 5.2. Argentometrie nepřímá (Volhardova metoda) 277 // 5.3. Odmčrné roztoky a základní látky v argentometrii 278 // 6. Merkurimetrie 279 // 6.1. Odmčrné roztoky a základní látky v merkurimetrii 280 // 7. Chelatometrie 280 // 7.1. Odmčrné roztoky a základní látky v chelatometrii 282 // 8. Oxidoredukční titrace 282 // 8.1. Manganometrie 283 // 8.1.1. Odmčrné roztoky a základní látky v manganometrii 284 // 8.2. Jodometrie 285 // 8.2.1. Jodometrie přímá 285 // 8.2.2: Jodometrie nepřímá 285 // 8.2.3. Odmčrné roztoky a základní látky v jodometrii 285